Жиры и масла животные и растительные. Определение содержания бенз(а)пирена. Метод обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии.
ГОСТ ISO 15302-2019
Настоящий стандарт устанавливает метод определения содержания бенз(а)пирена в нерафинированных или рафинированных маслах и жирах с применением обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), с использованием флуориметрического детектирования в диапазоне от 0,1 до 50 мкг/кг.
Пробу для испытания растворяют в петролейном эфире и добавляют бенз(b)хризен в качестве внутреннего стандарта. Далее пробу очищают на колонке, заполненной оксидом алюминия, и элюируют бенз(а)пирен с помощью петролейного эфира.
Высокоэффективный жидкостный хроматограф, состоящий из насоса для ВЭЖХ, инжектора с петлей объемом 50 мкл, колонки с обращенной фазой, электронного интегратора и регистрирующего устройства. При использовании автодозатора петлю инжектора промывают ацетонитрилом между последовательными инъекциями.
Стеклянная колонка для хроматографии длиной 300 мм и внутренним диаметром 15 мм, с фриттой и краном из политетрафторэтилена (ПТФЭ).
Водяные бани: одна — поддерживающая температуру (35 ± 2) °C, а другая — температуру (65 ± 2) °C.
Может использоваться испаритель мгновенного испарения, ротационный испаритель с вакуумом и водяной баней, поддерживающей температуру 40 °C.
еобходимо принять меры для предотвращения перекрестного загрязнения. В периоды между проведением определений систему подвергают тщательной очистке.
Защитная колонка с обращенной фазой, способная отделить бенз(а)пирен от совместно экстрагируемых веществ, вместе с подходящей предколонкой (например, предколонка из нержавеющей стали длиной 75 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная сорбентом Lichrosorb RP-18 (размер частиц 5 мкм)).
Колонка для ВЭЖХ с обращенной фазой длиной 250 мм и внутренним диаметром 4,6 мм (нержавеющая сталь) для полициклических ароматических углеводородов (ПАУ) (например, Chromspher 5 РАН или Vydac 201 ТР5).
Флуоресцентный детектор с длиной волны эмиссии 406 нм (щель 10 нм) и длиной волны возбуждения 384 нм (щель 10 нм). Детектор должен обладать требуемой производительностью для проведения анализа.
Маленькие флаконы с горловиной под алюминиевый колпачок объемом около 1 мл, с прокладками из ПТФЭ и алюминиевыми колпачками.
Устройство ручное для обжатия колпачков на флаконах.
Одноразовые пипетки.
Вода бидистиллированная, прошедшая фильтрацию через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Допускается использование деионизированной воды, полученной с помощью систем очистки и деминерализации воды.
Петролейный эфир (диапазон температур кипения от 40 °C до 60 °C) или гексан, подвергнутый повторной перегонке над гранулами гидроксида калия (4 г/л).
Ацетонитрил, пригодный для ВЭЖХ.
Тетрагидрофуран, пригодный для ВЭЖХ.
Смесь ацетонитрила и тетрагидрофурана, приготовленная путем смешивания 90 мл ацетонитрила и 10 мл тетрагидрофурана.
Толуол, пригодный для ВЭЖХ.
Сульфат натрия гранулированный безводный.
Оксид алюминия 4-й степени активности, приготовленный из нейтрального оксида алюминия с активностью выше 1-й степени, дезактивированного добавлением 10 мл воды к 90 г оксида алюминия. Из-за существующих различий в активности оксида алюминия различных марок рекомендуется проверить, что процедура дезактивации подходит для полного извлечения бенз(а)пирена из стандартного образца. Емкость встряхивают около 15 мин и дают содержимому отстояться в течение 24 ч. Оксид алюминия хранят в закрытой емкости при комнатной температуре.
Бенз(а)пирен чистотой 99,0 % по массе.
Бенз(b)хризен чистотой 99,0 % по массе.
