Продукты пищевые функциональные. Метод определения витамина D3.

Для определения массовой доли витамина D₃ применяют следующие средства измерений, вспомогательное оборудование и материалы:- весы по ГОСТ Р 53228 с пределами допускаемой абсолютной погрешности ±0,1 мг;

- спектрофотометр со спектральным рабочим диапазоном от 190 до 1100 нм, основной погрешностью измерений коэффициента пропускания не более 1%;

- кюветы кварцевые с длиной оптического пути 1 см;

- хроматограф для проведения анализа методом полупрепаративной ВЭЖХ, включающий следующие элементы: насос; устройство для ввода пробы; колонку для проведения анализа методом полупрепаративной НФ ВЭЖХ диаметром 0,4-0,46 см, длиной 25-30 см, заполненную силикагелем или силикагелем, модифицированным CN- или NH₂-группами с размером частиц 5 мкм; спектрофотометрический (длина волны детектирования 265 нм) или диодно-матричный детектор с погрешностью измерений не более 10% отн., устройство для сбора фракций, регистрирующее устройство (самописец или интегратор), позволяющее проводить измерение площади (или высоты) пика с погрешностью не более 1%; программное обеспечение для обработки полученных результатов измерений;

- хроматограф для проведения анализа методом аналитической ВЭЖХ, включающий следующие элементы: насос; устройство для ввода проб; колонку для проведения анализа методом аналитической ОФ ВЭЖХ диаметром 0,40-0,46 см, длиной 25-30 см, заполненную октадецилсиликагелем, с размером частиц 5 мкм; спектрофотометрический (длина волны детектирования 265 нм) или диодно-матричный детектор с погрешностью измерений не более 10% отн., регистрирующее устройство (самописец или интегратор), позволяющее проводить измерение площади (или высоты) пика с погрешностью не более 1%; программное обеспечение для обработки полученных результатов измерений;

- фильтры для фильтрования подвижной фазы и анализируемых растворов (например, с размером пор 0,45 мкм);

- микрошприцы типа "Гамильтон" вместимостью 0,2 см³ и 0,5 см³ для ввода проб в жидкостный хроматограф;

- пипетки градуированные 1(2,3)-1(2)-1-0,5(1,2,5,10,25) по ГОСТ 29227 или дозаторы автоматические с аналогичными или изменяемыми объемами доз с относительной погрешностью дозирования не более ±1%;

- цилиндры 1-50(100,250)-1(2) по ГОСТ 1770;

- колбы мерные 2-50(100,250,500,1000)-2 по ГОСТ 1770;

- пробирки мерные с притертыми пробками П-2-5(10,15,20,25)-0,1(0,2)ХС по ГОСТ 1770;

- стаканы В(Н)-1-50(100,150,250)ТХС по ГОСТ 25336;

- колбы круглодонные К-1-100(250,500)-29/32ТС по ГОСТ 25336;

- воронки В-36(56)-80ХС, В-75-110(140)ХС, В-100-150ХС по ГОСТ 25336;

- линейка металлическая с ценой деления 1 мм по ГОСТ 427;

- встряхиватель для колб и пробирок с диапазоном частот колебаний платформ 100-150 колебаний в минуту;

- центрифуга, обеспечивающая 4-6 тыс. об/мин;

- баня водяная с регулятором нагрева, поддерживающая температуру от 30°С до 100°С;

- баня ультразвуковая лабораторная рабочим объемом не менее 2 дм³;

- испаритель ротационный с диапазоном рабочего давления от 7 мм рт.ст. до 760 мм рт.ст. (от 9·10² Па до 10·10⁴ Па) или насос водоструйный по ГОСТ 25336;

- холодильники стеклянные лабораторные по ГОСТ 25336;

- термометр лабораторный жидкостный с диапазоном температур от 0 до 100°С, ценой деления шкалы 1°С по ГОСТ 28498;

- баллон с газообразным азотом по ГОСТ 9293, ос.ч.;

- бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026;

- плитка электрическая закрытого типа по ГОСТ 14919;

- мельница лабораторная электрическая;

- холодильник бытовой по ГОСТ 16317.

При выполнении измерений применяют следующие реактивы и материалы:

- абсолютный этиловый спирт (C₂H₅OH) массовой долей основного вещества не менее 99,9%;

- ректификованный этиловый спирт (C₂H₅OH) массовой долей основного вещества не менее 96% или по ГОСТ Р 51652, ГОСТ 18300;

- метиловый спирт (CH₃OH), массовой долей основного вещества не менее 99,9%;

- ацетонитрил (CH₃CN), массовой долей основного вещества не менее 99,8%;

- метилен хлористый (CH₂Cl₂), массовой долей основного вещества не менее 99,8%;

- н-гексан (C₆H₁₄), массовой долей основного вещества не менее 99,5%;

- этилацетат (C₄H₈O₂), массовой долей основного вещества не менее 99% или по ГОСТ 8981;

- 2-пропанол (C₃H₈O), массовой долей основного вещества не менее 99,5%;

- тетрагидрофуран (C₄H₈O), массовой долей основного вещества не менее 99,5%;

- петролейный эфир, перегнанный при температуре (50±10)°С, очищенный от перекисей;

- диэтиловый эфир, очищенный от перекисей, содержащий 0,1% пирогаллола;

- калия гидроокись (KOH) по ГОСТ 24363, х.ч. или ч.д.а., раствор KOH массовой долей 50%;

- натрий сернокислый (Na₂SO₄) безводный, массовой долей основного вещества не менее 99,5% или по ГОСТ 4166, х.ч.;

- дистиллированную воду по ГОСТ 6709;

- кислоту аскорбиновую (C₆H₈O₆), х.ч.;

- гидрохинон (C₆H₆O₂), массовой долей основного вещества не менее 99% или по ГОСТ 19627;

- пирогаллол (C₆H₆O₃), массовой долей основного вещества не менее 99%;

- бутилгидрокситолуол - БГТ (C₁₅H₂₄O), массовой долей основного вещества не менее 99%, раствор БГТ в н-гексане массовой концентрацией 2 мг/см³;

- эргокальциферол (витамин D₂), M(C₂₈H₄₄O)=396,7 г/моль, массовой долей основного вещества не менее 98%;

- холекальциферол (витамин D₃), M(C₂₇H₄₄O)=384,6 г/моль, массовой долей основного вещества не менее 98%.